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抗酸土脂環酸芽孢桿菌單克隆抗體實驗

日期:2018/3/26 11:52:42 點擊次數 1835 發布單位:天義生物谷  錄入:李清

摘要:脂環酸芽孢桿菌(Alicyclobacillus)俗稱耐熱菌、嗜酸耐熱菌、耐熱耐酸菌等,能引起巴氏滅菌果汁風味改變甚至腐敗,而目前的殺菌條件難以消除該菌。

美國、歐洲大部分果汁消費國脂環酸芽孢桿菌達到了小于 1 個/10 mL 的要求,而我國部分濃縮果汁中脂環酸芽孢桿菌的含量超過了1個/10 mL,并且我國果汁產品中脂環酸芽孢桿菌的污染沒有制定相應的限量值以及檢測方法的滯后,已成為制約我國濃縮蘋果汁出口的主要障礙。

因此,如何在濃縮果汁中快速準確地檢測和鑒定脂環酸芽孢桿菌已成為蘋果濃縮汁生產企業亟待解決的問題。目前脂環酸芽孢桿菌的檢測方法主要有傳統檢測方法、數值分類技術、細胞膜脂肪酸組成檢測、代謝產物的檢測、基于聚合酶鏈式反應(Polymerase chain reaction,PCR)的分子生物學檢測、傅里葉紅外光譜檢測等,但這些方法對所需儀器設備以及設備操作人員技術要求較高,檢測方法復雜,不利于濃縮蘋果汁生產廠家在加工生產環節對該菌進行有效、簡便的檢測和控制,且不同檢測方法判定標準的差異會導致結果存在一定的差異,而基于 PCR 的分子生物學方法快速、簡便,因此成為目前檢測該菌的首選實驗室方法。

為了建立脂環酸芽孢桿菌快速檢測方法,利用免疫膠體金的快速高效、靈敏準確、結果受外因影響較少、安全簡便、不需任何儀器和設備、成本低廉、所需試劑和樣本量少、實驗結果可長期保存等特點;從而有效地在生產環節中大大降低原料、主要生產工段、生產用水、超濾出的蘋果清汁等環節的脂環酸芽孢桿菌的污染,以及時指導生產。本試驗利用細胞融合技術,制備了單克隆抗體并對其特異性進行鑒定,旨在建立抗脂環酸芽孢桿菌的雜交瘤細胞株;并對單克隆抗體的特性進行研究,為檢測用膠體金試紙條的制備打下良好的基礎,從而期望實現對脂環酸芽孢桿菌的快速檢測,而利用其制備單克隆抗體以及制備膠體金免疫層析試紙檢測濃縮果汁中 A. acidoterrestris 在國內外尚屬首次。

 
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