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細胞培養易出現的問題解析

日期:2018/2/26 17:51:47 點擊次數 1963 發布單位:天義生物谷  錄入:李清

    摘要:做細胞培養的同學如果互相交流會發現,不同的實驗室有些規則是不一樣的,初學者經常不知對錯,今天就和大家總結一下這些糾結的問題,希望對你的細胞之路有所幫助。


細胞冷凍管解凍培養時,是否應馬上去除DMSO?


    除少數特別注明對DMSO敏感之細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中,待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。


可否使用與原先培養條件不同之培養基?


    不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基,若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活。


可否使用與原先培養條件不同之血清品牌?


    可以,但是不能頻繁更換。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源,血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。更換不同品牌的血清之初,可能細胞會有一個短暫的適應過程,適應后,好的血清會促進細胞良好生長。建議選擇合適的放心品牌血清,而不是在假貨橫行的當下選擇昂貴的大牌血清,因為高價格大品牌是假貨的重災區。即使買到正品,也肯定造成了資金的浪費。Clark血清致力于打造國內第一放心品牌血清,從銷售渠道控制、革命性外包裝、反饋跟蹤體系和重獎打假四個方面入手,開國內先河,保證每一瓶都是正品,讓用戶放心。


培養基中是否須添加抗生素?


    除于特殊篩選系統中外,一般正常培養狀態下,培養基中不應添加任何抗生素。


細胞冷凍培養基之成份為何?


    動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養基是含5 - 10% DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90 - 95 %原來細胞生長用之新鮮培養基均勻混合之。注意:由于DMSO 稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成。 


DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?


    冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO (如Sigma D2650),其本身即為無菌狀況,第一次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于4 C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質,并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質濾膜。

 
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