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放線菌的形態觀察方法及注意事項

日期:2018/9/6 19:30:56 點擊次數 1432 發布單位:天義生物谷  錄入:李清

放線菌是由不同長短的纖細的菌絲所形成的單細胞菌絲體。菌絲體分為兩部分,即潛入培養基中的營養菌絲(或稱基內菌絲)和生長在培養基表面的氣生菌絲。有些氣生菌絲分化成各種孢子絲,呈螺旋形、波浪形或分枝狀等。孢子常呈圓形、橢圓形或桿形。氣生菌絲及孢子的形狀和顏色常作為分類的重要依據。


想要了解放線菌的形態首先要準備實驗材料和用具:細黃鏈霉菌(streptomycs micuoflavus)又稱5406的培養平皿,棘孢小單孢菌(Micromonospora echinospora)的玻璃紙培養平皿。 0.1%美藍染色液、石炭酸復紅染色液; 蓋玻片、載玻片、鑷子、接種環、顯微鏡、涂布器、玻璃紙、打孔器。


操作步驟


(一)觀察自然生長狀態的放線菌


用鑷子小心取出用插片法培養的5406菌培養皿中的一張蓋玻片,將其背面附著的菌絲體擦凈。然后將長有菌的一面向上放在潔凈的載玻片上,用低倍鏡、高倍鏡觀察。找出3類菌絲及其分生孢子,并繪圖。注意放線菌的基內菌絲、氣生菌絲的粗細和色澤差異。


(二)水封片觀察


取一滴美藍染色液置于載玻片中央,將用搭片法培養棘孢小單孢菌培養皿中的蓋玻片取出,并將有菌面朝下,放在載玻片上,浸在染色液中,制成水封片,用高倍鏡觀察其單個分生孢子及其基內菌絲,并繪圖。


(三)玻璃紙法的鏡檢觀察


1.直接玻璃紙觀察   分別用5406和棘孢小單孢菌的玻璃紙制片觀察。制片時,于載玻片上放一小滴蒸餾水,將含菌玻璃紙片小心剪下一小塊,移至載玻片上,并使有菌面向上。在玻璃紙與載玻片間不能有氣泡,以免影響觀察。將制片于顯微鏡下觀察,先用低倍鏡觀察菌的立體生長狀況,再用高倍鏡仔細觀察。注意區分5406菌的基內菌絲、氣生菌絲和彎曲狀或螺旋狀的孢子絲。觀察棘孢小單孢菌時注意把視野調暗,其基內菌絲纖細發亮,其單個分生孢子發暗,直接生長在基內菌絲長出的小梗上。繪圖。


2.印片染色法觀察   用鑷子取潔凈載玻片并微微加熱,然后用這微熱載玻片蓋在長有5406或棘孢小單孢菌的平皿上,輕輕壓一下,注意將載玻片垂直放下和取出,以防載玻片水平移動而破壞放線菌的自然形態。反轉有印痕的載玻片微微加熱固定.用石炭酸復紅染色l min,水洗,晾干。用油鏡觀察。繪圖。注意比較兩種菌的形態特征有何不同。


注意事項


1.培養放線菌中要注意,放線菌的生長速度較慢,培養期較長,在操作中應特別注意無菌操作,嚴防雜菌污染。


2.玻璃紙法培養接種時注意玻璃紙與平板瓊脂培養基間不宜有氣泡,以免影響其表面放線菌的生長,


3.不同觀察方法中嚴格按要求進行,注意菌體的上下位置。

 
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