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菌種保藏及活化使用的注意事項

日期:2018/5/27 17:58:23 點擊次數 1717 發布單位:天義生物谷  錄入:李清

菌種保藏的方法很多,但原理大同小異。首先要挑選優良純種。利用微生物的孢子、芽孢及營養體;其次,根據其生理、生化性,人為創造低溫、干燥或缺氧等條件,抑制微生物的代謝作用,使其生命活動降低到極低的程度或處于休眠狀態,從而延長菌種生命以及使菌種保持原有的形狀,防止變異。不管采用哪種保藏方法,在菌種保存過程中要求不死亡、不污染雜菌和不退化。

短期:斜面保藏

斜面保藏

斜面保藏是目前最普遍的短期保藏法,操作簡單,使用方便,但需定期接種。因此工作量較大,而且傳代次數多易發生變異,因此,僅適用于短期經常使用的菌種。

1. 配制培養基,營養成分濃度稍低為宜,特別是糖類盡可能降低,產酸菌種,則應添加少量碳酸鈣;

2. 斜面裝液量,斜面以傾斜后不超過試管長度 1/2 為宜;

3. 斜面培養,溫度較最適稍低,時間較最適略長;

4. 生長完成后,密封置于 2~8℃的冰箱中保藏。每傳代一次,霉菌、放線菌及有芽孢的細菌可保存 1~3 個月,酵母菌 2 個月,細菌1個月。

活化使用:

將斜面從冰箱中取出,細菌挑取菌落增菌,或霉菌切塊傳代培養,培養好即可使用。

長期:冷凍保藏

冷凍保藏

冷凍保藏是目前使用較為廣泛的長期保藏法之一,適用于所各類微生物,較之于斜面保藏,減少了工作量,延長了保藏時間。

1. 準備斜面或平板新鮮培養物一個,10%的無菌甘油溶液;

2. 用甘油溶液將菌體或孢子洗脫下來,形成菌懸液;

3. 菌懸液分裝,凍存管裝液 1mL/支,后置于程序降溫盒;

4. 將程序降溫盒置于-80℃冰箱凍存;

5. 可保藏 1-2 年。

活化使用:

1. 將凍存菌株置于凍存盒中取出,準備水浴溶解,切勿常溫融化;

2. 將菌株迅速置于水浴速溶,細菌 40℃,真菌 30℃,約 2min 全部溶解后接種到適宜培養基;

3. 采用適宜條件培養完成即可。 

 
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