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土著菌菌種

日期:2008/10/27 15:14:44 點擊次數 12458 發布單位:天義生物谷  錄入:李清

 


一、土著菌的產品特點


   1、外觀:淺黃色粉末,略帶腥臭味。  
   2、主要成分:產絲放線菌、枯草芽孢桿菌、酵母菌、乳酸菌、載體。總菌數≥200億/克  
   3、土著菌中各種細菌的功效與作用機理:

1、土著菌中放線菌的作用機理

   
放線菌的形態比細菌復雜些,但仍屬于單細胞。在顯微鏡下,放線菌呈分枝絲狀,我們把這些細絲一樣的結構叫做菌絲,菌絲直徑與細菌相似,小于1微米。菌絲細胞的結構與細菌基本相同。放線菌有許多交織在一起的纖細菌體,叫菌絲。在固體營養物質上生長時,不同的菌絲分工不同,有的扎根于它們的食物中“埋頭大吃”,這是專管吸收營養的營養菌絲,由于這些菌絲是生長在培養基內的,因而也稱為基內菌絲;有的朝天猛長,這是由營養菌絲發育后形成的氣生菌絲。放線菌長到一定階段,便開始“生兒育女”。它們先在氣生菌絲的頂端長出孢子絲,等到成熟之后,就形成各種各樣形態各異的孢子。孢子的外形有的像球,有的像卵,有的像稈子,有的像瓜子。它們可以隨風飄散,遇到適宜的環境,就會在那里“安家落戶”,開始吸收水分和營養,萌生成新的放線菌。

   放線菌最喜歡生活在有機質豐富的微堿性土壤中,泥土所特有的“泥腥味”就是由放線菌產生的。它們中絕大多數是腐生菌,能將動植物的尸體腐爛、“吃”光,然后轉化成有利于植物生長的營養物質,在自然界物質循環中立下了不朽的功勛。還有一類叫弗蘭克氏菌的放線菌,生長在許多豆科植物的根瘤里,能固定大氣中的氮,成為植物能利用的氮肥。除了生產抗生素外,放線菌在工業上還有許多其他貢獻。例如,利用放線菌還可以生產維生素B12、-胡蘿卜素等維生素,生產蛋白酶、溶菌酶,以及用于生產高果糖漿的葡萄糖異構酶等酶制劑。另外,放線菌在石油工業和污水處理等方面也可發揮一技之長。 

   放線菌的繁殖

   放線菌的培養條件

   放線菌大多數是異養菌,營養要求不是很高,可以在簡單的培養基上生長起來。需要的碳源有淀粉、糊精、葡萄糖、麥芽糖和甘油等,氮源中可以利用蛋白胨、氨基酸、硝酸鹽、銨鹽、尿素等。而且放線菌一般都需要K、Mg、Fe、Cu、Ca等。

   其它方面的特性有,放線菌大多數是需氧菌,缺氧的情況下它不能生長,會窒息而死的。
它生長的最適溫度是28-32℃,最適生長PH約為7。2-7。6,放線菌的培養時間比細菌長一些,一般都需要3-7天才能長成菌落。 

2、土著菌中枯草芽孢桿菌的作用機理
   1、枯草芽孢桿菌菌體在生長過程中產生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短桿菌肽等活性物質對致病菌或內源性感染的條件致病菌有明顯的抑制作用; 
   2、枯草芽孢桿菌能迅速消耗消化道內環境中的游離氧,形成腸道低氧環境,促進有益厭氧菌生長,并產生乳酸等有機酸類,降低腸道PH值,間接抑制其它致病菌的生長; 
   3、 枯草芽孢桿菌能刺激動物免疫器官的生長發育,激活淋巴細胞,提高免疫球蛋白和抗體水平,增強細胞免疫和體液免疫功能,提高群體免疫力; 
   4、枯草芽孢桿菌菌體能自身合成消化性酶類,如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纖維素酶等,在消化道中與內源酶共同發揮作用,提高飼料消化率; 
   5、枯草芽孢桿菌能合成多種維生素,提高動物體內干擾素和巨噬細胞的活性。

3、土著菌中乳酸菌的作用機理

   
乳酸菌是一種存在于人類體內的益生菌。乳酸菌能夠將碳水化合物發酵成乳酸,因而得名。乳酸菌能夠幫助消化,有助人體腸臟的健康,因此常被視為健康食品,添加在酸奶之內。

   乳酸菌的十大生理功能

   1、防治有色人種普遍患有的乳糖不耐癥(喝鮮奶時出現的腹脹、 腹瀉等癥狀)。
   2、促進蛋白質、單糖及鈣、鎂等營養物質的吸收,產生維生素B族等大量有益物質。
   3、使腸道菌群的構成發生有益變化,改善人體胃腸道功能,恢復人體腸道內菌群平衡,形成抗菌生物屏障,維護人體健康。
   4、抑制腐敗菌的繁殖,消解腐敗菌產生的毒素,清除腸道垃圾。
   5、抑制膽固醇吸收,降血脂、降血壓作用。
   6、免疫調節作用,增強人體免疫力和抵抗力。
   7、抗腫瘤、預防癌癥作用。
   8、提高SOD酶活力,消除人體自由基,具抗衰老、延年益壽作用。
   9、有效預防女性泌尿生殖系統細菌感染。
   0、控制人體內毒素水平,保護肝臟并增強肝臟的解毒、排毒功能。

二、
土著菌的概念: 


   
土著菌就生活在我們周圍的自然環境中,走進闊葉樹林或竹林,在落葉且腐殖質多地方,扒開樹葉或雜草就可以看到細絲壯白色菌落,這就是有益的土著微生物。
   土著微生物是多種有益微生物的混合群,土著微生物按好嫌氣性分有好氣菌、嫌氣菌;按菌種分有酵母菌、曲霉菌、放線菌、乳酸菌、芽孢菌等。
   可以在不同的季節、不同的地點采集不同的菌種。采集到的原始菌種應放在室內陰涼、干燥處保存。
   活性好的土著菌可以用由人工培養、擴陪成純度高的微生物菌群!   
   土著菌發酵床養豬技術、養雞技術是利用自然環境中的生物資源,采集土壤中的多種有益微生物進行培養擴繁,使其形成有相當活力的微生物母種,再按一定比例將微生物母種與鋸木屑等輔料和活性劑混合發酵形成有機墊料。讓豬、雞從小到大都生活在這種有機墊料上,豬、雞的排泄物被有機墊料里的微生物迅速降解、消化,不需進行人工處理,達到零排放。    

三、
土著菌的采集方法 :
 

   
1、采集地方:可以在當地山上落葉聚集較多的山谷、樹林中采集。 
   2、具體辦法:把做的稍微有一點硬的大米飯(1kg~1.5kg),裝入用干凈杉木板做的小木箱(25cm×20cm×10cm)約三分之一,大米飯上面蓋上宣紙,封好口,將其埋在當地山上落葉聚集較多的山谷樹林中。為防止野生動物糟蹋,木箱最好罩上鐵絲網。夏季經三~五天,春秋經六~七天,周邊的土著微生物潛入到米飯中,在米飯上形成白色菌落(放置時間稍長時會形成各種顏色菌落,雖然也能利用,但最好還是用白色菌落)。 
   3、擴陪方法:土著菌采集成功后摻入原材料量1/3左右的紅糖,將其混合均勻(數量按壇子容量的三分之一),把變的稀軟狀態的米飯裝入壇子里,蓋上宣紙,用線繩系好口,放置在溫度18℃左右地方。大約放置7天左右,就會變成濃稠液體狀態,飯粒多少會有些殘留,但不礙事。簡單過濾后就是土著微生物菌種原液。 用的時候直接稀釋后和EM菌種原液一起使用!

    以下步驟適用于菌種生產單位實驗室!普通用戶可以不做!

   4、提純復壯: 有條件的可以在實驗室進行

   
一般情況下,采來的樣品可以直接進行分離,但是如果樣品中我們所需要的菌類含量并不很多,而另一些微生物卻大量存在。此時,為了容易分離到所需要的菌種,讓無關的微生物至少是在數量上不要增加,即設法增加所要菌種的數量,以增加分離的幾率。可以通過選擇性的配制培養基(如營養成分、添加抑制劑等),選擇一定的培養條件(如培養溫度、培養基酸堿度等)來控制。具體方法是根據微生物利用碳源的特點,可選定糖、淀粉、纖維素,或者石油等,以其中的一種為唯一碳源,那么只有利用這一碳源的微生物才能大量正常生長,而其他微生物就可能死亡或淘汰。對G一菌有選擇的培養基(如結晶紫營養培養基、紅—紫膽汁瓊脂、煌綠膽汁瓊脂等)通常含有5%~10%的天然提取物。在分離細菌時,培養基中添加濃度一般為50μg/m1的抗真菌劑(如放線菌酮和制霉素),可以抑制真菌的生長。在分離放線菌時,通常于培養基中加入1~5m1天然浸出汁(植物、巖石、有機混合腐質等的浸出汁)  作為最初分離的促進因子,由此可以分離出更多不同類型的放線菌類型;放線菌還可以十分有效地利用低濃度的底物和復雜底物(如幾丁質),因此,大多數放線菌的分離培養是在貧脊或復雜底物的瓊脂平板上進行的,而不是在含豐富營養的生長培養基上分離的;在放線菌分離瓊脂中通常加入抗真菌劑制霉菌素或放線菌酮,以抑制真菌的繁殖;此外,為了對某些特殊種類的放線菌進行富集和分離,可選擇性地添加一些抗生素(如新生霉素)。在分離真菌時,利用低碳/氮比的培養基可使真菌生長菌落分散,利于計數、分離和簽定;在分離培養基中加入一定的抗生素如氯霉素、四環素、卡那霉素、青霉素、鏈霉素等即可有效地抑制細菌生長及其菌落形成;抑制細菌的另外一些方法有:在使用平皿之前,將平皿先干燥3~4天;降低培養基的pH值或在無法降低pH時,加入1:30000玫瑰紅。這樣有利于下階段的純種分離。

   通過增殖培養,樣品中的微生物還是處于混雜生長狀態。因此還必須分離,純化。在這一步,增殖培養的選擇性控制條件還應進一步應用,而且要控制得細一點,好一點。同時必須進行純種分離,常用的分離方法有稀釋分離法、劃線分離法和組織分離法。稀釋分離法的基本方法是將樣品進行適當稀釋,然后將稀釋液涂布于培養基平板上進行培養,待長出獨立的單個菌落,進行挑選分離。劃線分離法要首先倒培養基平板,然后用接種針(接種環)挑取樣品,在平板上劃線。劃線方法可用分步劃線法或一次劃線法,無論用哪種方法,基本原則是確保培養出單個菌落。組織分離法主要用于食用菌菌種或某些植物病原菌的分離。分離時,首先用10%漂白粉或0.1%升汞液對植物或器官組織進行表面消毒,用無菌水洗滌數次后,移植到培養皿中的培養基上,于適宜溫度培養數天后,可見微生物向組織塊周圍擴展生長。經菌落特征和細胞特征觀察確認后,即可由菌落邊緣挑取部分菌種進行移接斜面培養。

   對于有些微生物如毛霉、根霉等在分離時,由于其菌絲的蔓延性,極易生長成片,很難挑取單菌落。常在培養基中添加0.1%的去氧膽酸鈉或在察氏培養基中添加0.1%的山梨糖及0.01%的蔗糖,利于單菌落的分離。

   經過分離培養,在平板上出現很多單個菌落,通過菌落形態觀察,選出所需菌落,然后取菌落的一半進行菌種鑒定,對于符合目的菌特性的菌落,可將之轉移到試管斜面純培養。這種從自然界中分離得到的純種稱為野生型菌株,它只是篩選的第一步,所得菌種是否具有生產上的實用價值,能否作為生產菌株,還必須采用與生產相近的培養基和培養條件,通過三角瓶的容量進行小型發酵試驗,以求得適合于工業生產用菌種。這一步是采用與生產相近的培養基和培養條件,通過三角瓶的容量進行小型發酵試驗,以求得適合于工業生產用菌種。如果此野生型菌株產量偏低,達不到工業生產的要求,可以留之作為菌種選育的出發菌株。 

【注意事項】
 
  1、本品為活菌制劑,細菌活性較強,應密閉陰涼避光保存。
  2、禁止與抗生素、殺蟲劑、殺菌劑、消毒劑、強酸強堿類產品混合使用。
  3、使用本品時免疫程序正常進行。
 
【有效日期】3年
 
【包裝規格】20公斤/ 件

【貯藏辦法】陰涼干燥處密封保存

 
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